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組織培養用の植物ホルモン溶液を調製する方法

序章

植物によって合成される植物成長調節剤は、それらの成長と発達に必要です。しかし、 人工的な条件で実験室内で同じ反応を誘発するために、 それは、外因性の植物成長調節剤を培地に加えることを必要とします。

今日、 いくつかの天然および合成植物成長調節剤(PGR)、 植物ホルモン、 または植物ホルモンは、組織培養実験で使用するために利用可能です。しかし、PGRソリューションを準備する方法は、私たちの文化家が直面する最も一般的な問題または混乱です!

そう、 記事上で、 植物成長調節剤のストック溶液と、粉末形態のホルモンを溶解するために必要なNaOH(溶媒)のストック溶液を調製する方法について説明しました。

PGRのストック溶液を準備する方法は?

植物成長調節剤のストック溶液を調製するには、以下の手順に従います。

  • あなたがストックを準備することをいとわないホルモンごとに50mlのファルコンチューブを取ります。
  • ホルモンの名前で各チューブに適切にラベルを付けます。
  • 1mg / Lの植物成長ホルモン作業溶液を調製するには、 水で1g / Lの溶液を準備します。
  • ビデオでは、 粉末状のホルモン0.05グラム(50 mg)を測定して、50mlのストック溶液を調製します。
  • カップとヘラを使用して、各植物成長調整剤を測定できます。しかし、 ストック溶液の相互汚染を避けるために、別の植物成長調整剤を測定するたびに、カップを交換し、スパチュラを清掃または交換する必要があります。

注:PCTの100グラムの植物成長調節剤のボトルから、 100リットルのストック溶液を準備できます。しかし、 1リットルの培地を作るのに必要なストック溶液は1mlだけです。そう、 全体として、ボトルあたり10万リットルのメディアを準備できます。

  • 次のステップは、成長調整剤の粉末形態を溶解することです。水に直接溶けることはありませんが、 だからあなたは溶剤が必要です。
  • 成長調節剤の粉末形態を溶解するための溶媒としてNaOHを使用します。
  • マイクロピペットを使用して1mlのNaOHを測定し、粉末状の成長調節剤が入っている50mlのファルコンチューブに加えます。ホルモン間の相互汚染を避けるために、次の成長調節剤を混合する前に、適切に混合し、ピペットチップを交換してください(複数のホルモンの植物ホルモンストック溶液を準備している場合)。

小さなスターラーを使用するか、チューブまたはボトルを振って、粉末ホルモンを溶媒に溶解することもできます。

注:1MNaOHを調製する手順を以下に示します。そう、 準備した1M溶液から1mlNaOHを取り、植物成長調節剤を溶解します。

  • 次に、ピペットを使用して49 mlの蒸留水(粉末ホルモンを溶解するためにすでに1 mlのNaOHを追加しているため)を追加して、ホルモンのストック溶液50mlを作成します。
  • それで、 原液は滅菌されていないため、滅菌する時が来ました。ホルモンが耐熱性であるかどうかを知っておく必要があります。
  • ホルモンが耐熱性でない場合は、 メディアが摂氏60度以上に冷却された後、溶液をシリンジでろ過する必要があります。耐熱性がある場合は、溶液をオートクレーブにかけることができます。
  • これで、ストック溶液を実験に使用する準備が整いました。あなたはそれをあなたの望む濃度にするためにそれを希釈することができます。

1MNaOH溶液の調製方法は?

水酸化ナトリウム(NaOH)は、培地のpHを上げるため、または粉末状の成長調節剤を溶解するために使用されます。

  • NaOH原液を調製するには、NaOHペレットが必要です。 へら、 三角フラスコ。
  • ピペットを使用して、100mlの蒸留水を三角フラスコに加えます。
  • NaOHの1モル溶液を作成するには、次の式が必要です。

モル濃度=いいえ。溶質のモル数/ 1リットル

と、 1モルの水酸化ナトリウム=40グラム

そう、 1MのNaOH溶液を調製したい場合は、 1Lの溶液に40グラムのNaOHを溶かす必要があります。

しかし、 ここでは、100mlのストック溶液のみを準備しています。 そのために、 100mlの水に4グラムのNaOHを溶かすだけで済みます。

  • 計量機のヘラを使用して4グラムのNaOHを測定します。
  • 測定したNaOHペレットを水に加え、攪拌して均一な溶液にします。
  • ペレットが溶解した後、 溶液を保存ボトルに移します。
  • 1モルのNaOH溶液は、実験に使用する準備ができています。

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