ステファン・フルエル、 MixscienceのJulieCastierとMaximeHugonin、 フランス、 Yersiniaruckeriが挑戦したニジマスOncorhynchusmykissの耐性とパフォーマンスを改善するための商業的な植物性物質の可能性を評価するためのポルトガルでの試験実施に関する報告
ニジマスに対する市販の植物性溶液の影響
Oncorhynchus mykiss）Yersiniaruckeriが挑戦
StéphaneFrouel著、 養殖プロジェクトマネージャー、 ジュリーカスティエ、 RIDプロジェクトマネージャーおよびMaximeHugonin、 養殖製品マネージャー、 Mixscience、 フランス
養殖は世界で最も急速に成長している食料生産部門であり、 世界の食用魚生産の3分の1に貢献しています。
魚の摂取による栄養上の利点は、タンパク質の利用可能性にプラスの関係があります。 これは、開発途上国の貧困率を下げるのに役立ちます。
ニジマスOncorhynchusmykissは、最も重要な養殖水生種の1つです。専門家は、世界のニジマスの消費量が950に達したと想定しています。 今年の初めに年間000トン。
このボリュームの大部分は水産養殖によって提供されています、 養殖マスの世界販売量は約830本に達し、 000トン。鮭の継続的な比較的高いコストは、ニジマスがより安価な代替魚としての地位を確立するのを見てきました、 同じ健康上の利点の多くを提供します。
専門家は、今後10年間で世界のニジマス市場の年複利成長率を約5％と予測しています。
それにもかかわらず、 このマス産業は、農場生産の収益性と品質に大きな影響を与える継続的な課題と病気に直面しています。
サケ科の魚の深刻な病気
主な細菌感染症の中で、 腸内赤口（ERM）病は、サケ科の魚種の深刻な敗血症性細菌感染症です。それはエルシニア・ルッケリによって引き起こされます、 宿主範囲が広いグラム陰性桿菌腸内細菌、 地理的に広く分布しており、重大な経済的損失を引き起こします。
この病気の名前は、口と舌の角に現れる皮下出血に由来しています。 他の臨床徴候には眼球突出が含まれます、 肌の黒ずみ、 脾腫および濃い黄色の液体の蓄積を伴う下部腸の炎症。バクテリアは二次鰓ラメラを経由して魚に侵入し、そこから それは血液や内臓に広がります。現在まで、 この問題の主な解決策は、抗生物質の使いやすさと治癒的治療における迅速な効果のおかげで、抗生物質の使用が残っています。
不幸にも、 化学物質の使用と乱用は、抗生物質耐性や環境への悪影響などの公衆衛生上の懸念を引き起こします。これは、場合によっては、これらの救済策が養殖生産とそれに関連する製品を否定的な公共イメージを獲得することにつながります。代替案を探求するために、それらの使用を減らす活発な研究が現在進行中です。
特定の抗菌性および/または免疫調節特性を備えた栄養および飼料添加物は、これらの課題の多くで業界をサポートするためにますます重要になっています。
これらの選択肢の中で、 これには、植物性物質などのソリューションが含まれます。 成長パフォーマンスの向上など、興味深いメリットが見つかりました。 飼料効率の最適化と耐病性。
それらの中の一つ、 Mixscienceによって開発された フランス、 さまざまな水生種において、実験室からフィールドスケールまでその効率が証明されています（Hugonin et Frouel、 2019）。この研究では、 著者らは、エルシニア・ルッケリによる感染に対するニジマス（Oncorhynchus mykiss）の耐性に対するその有効性を調査しようとしました。
さらに、 マス業界のバリューチェーン全体にアプリケーションを拡張し、製品が農場または押出プロセスを通じて飼料工場のいずれかに適用できるようにするために、 製品は、押し出し飼料で直接テストするか、プロセス後に飼料を上着でテストしました。次に、得られた生体効率を比較しました。
マストライアル
試験はポルトガルの屋内施設で実施されました。 ニジマス（Oncorhynchus mykiss）は、試験中の実験種である商業農場から生まれました。魚は正式に認可された運送業者によって実験施設に移送され、3週間衛生検疫に保管されました。
それらの輸送に関連して、有意な死亡率または病理学的兆候は観察されなかった。この検疫期間中、 魚は維持され、標準的な市販のマスの餌で飼育されました。
試験には3つの異なる実験段階がありました：適応期間、 図1に示すように、給餌期間とチャレンジ期間は、合計4つの食事療法で構成されました。 すべて単一の基礎製剤に基づいています。
この基礎製剤には、海洋由来のタンパク質（魚粉および魚の加水分解物）の20％と、大豆タンパク質濃縮物などの植物成分が含まれていました。 小麦グルテン、 コーングルテンミール、 大豆粕、 エンドウ豆と小麦全体。魚油と菜種油のブレンドが主な脂質源として使用されました。この基本的な食事は、栄養不足を避けるために、結晶性必須アミノ酸と無機リン酸塩源で補われました。すべての食事は等窒素（44％の粗タンパク質）でした、 等脂質（22パーセントの粗脂肪）および等エネルギー（22.5MJ / kg）。
この食事は、チャレンジされていないポジティブコントロール[PC]とチャレンジされたネガティブコントロール[NC]の両方の治療を与えるのに役立ちました。この基礎処方には、5 kg /トンの試験添加剤[PhytogenicEX]がさらに追加されました。 製品はマッシュに組み込まれています（押し出し前）。
押し出しとトップドレッシングの用途を比較するために、 基礎処方を含む1つの食餌も、押し出し後に5 kg /トンの試験添加物[PhytogenicTD]でトップドレスを付けました。
ダイエットは、押し出しとすべての粉末成分を使用して製造されました。 植物性（植物性EX）を含む、 二重らせんミキサーで目的の製剤に応じて混合し、マイクロ粉砕機ハンマーミルで粉砕（400µm未満）しました。ダイエットは、スクリュー直径55.5mm、温度範囲106〜111ºCのパイロット規模の二軸スクリュー押出機を使用して製造されました。飼料を振動流動床で乾燥させて乾燥させた。
トップドレスの植物性（植物性TD）による治療の場合、 乾燥後、 オイルと製品は真空コーティングによって塗布されました。油と添加剤の懸濁液を、真空（800mbar）下で約2分間ペレットに噴霧しました。
フェーズI-成長パフォーマンストライアル
平均初期体重（IBW）が26.8±1.6gのニジマスのストックに、35日間で4つの実験食のうちの1つを与えました。魚は、再循環された淡水が供給される四角形のPVCタンク（容量：750L）で成長しました。
裁判を通して、 平均水温は15±0.3ºC、平均溶存酸素レベルは6.4±0.5mg / Lでした。魚は12:12（明：暗）の制御された日長レジームにさらされました。魚は視覚的な満腹感に手で与えられました、 1日3食（09：00、 平日は14:00と17.00）、週末は1日2回（09:00と14:00）。飼料の浪費を避け、飼料摂取量を正確に定量化できるように細心の注意を払い、試験の開始時と終了時に魚の体重を測定しました。
フェーズII-エルシニア・ルッケリによる病気の挑戦
35日間の給餌後、 各食餌療法からの魚は、Yersiniaruckeriによる強い病気の挑戦にさらされました。 ポルトガルのニジマスから分離されました。細菌は、トリプティックソイブロス（TSB）またはNaClを最終濃度1％（w / v）で添加したトリプティックソイ寒天培地（TSA）で22℃で日常的に培養されました。
両方の培養物は、15パーセント（v / v）のグリセロールを添加したTSBで-80℃で保存しました。に
魚の腹腔に注射するための接種材料を準備し、 貯蔵された細菌100μLをTSA上で22℃で一晩培養しました。細菌はTSAから指数関数的に収集され、滅菌TSBに再懸濁されました。以前のチャレンジデータに基づいて、 魚の20〜30パーセントを殺すための意図された細菌濃度（LD50）は、吸光度を読み取り、その成長曲線に対して4 x 106コロニー形成単位（CFU）/ mlに調整することによって得られました。得られた培養物をTSAプラットにプレーティングし、コロニー形成単位（CFU / ml）を数えることにより、細菌濃度を確認した。
35日間の給餌期間の後、 平均体重（100±5g）の食事療法あたり80匹の魚、 チャレンジルームに移し、100μlのYersinia ruckeri（3.6 x 106CFU / ml）を腹腔内注射しました。唯一の例外は、PC処理による魚でした。 同量のハンクス平衡塩類溶液（HBSS）を腹腔内注射した。その後、 20匹の腹腔内注射された（エルシニアまたはHBSS）魚のグループは、60Lの水族館にランダムに分布しました。
感染チャレンジ期間中、 各食事療法は4回テストされました。魚の大量死は17日間記録されました。 すべての死んだ魚の体重が記録されています。食欲減退を示していますが、 チャレンジ期間中、魚には対応する餌が与えられました。水の飼育条件は、成長性能段階で記録されたものと同じに保たれました（温度：15±0.5°C;溶存酸素> 6.0mg / L）。
植物性のパフォーマンスへの影響
チャレンジの設定前の給餌期間中に死亡は発生せず、植物性物質が通常の条件下で悪影響を及ぼさなかったことを示しています。
35日間の実験的給餌期間（フェーズI）の終わりに、 ニジマスは、最高のパフォーマンスの治療で初期体重の3.9倍の増加を示しました。食事療法は、最終体重（FBW）および比成長率（SGR）に有意な影響を及ぼしませんでした（P <0.05）。
したがって、 植物性サプリメントも飼料適用モード（押し出し前または押し出し後）も、ニジマスのパフォーマンス基準に影響を与えるようには見えませんでした[表1を参照]。
統計的有意性がなく、非常に許容できる範囲内にある場合、 5kg /トンのトップコーティング（植物性TD）によって適用された製品による処理は、FCRのわずかな増加を示す傾向がありました。 その結果、PERが低くなります。 PhytogenicEXよりも 同じ製品用量がマッシュに適用された（前押し出し）。問題があるとは見なされていませんが、 この側面は、より長い給餌期間中に評価する必要があります。
病害抵抗性に対する植物性の影響
挑戦の後、 PC処理による魚の総死亡率（Yersinia ruckeriに感染していない、 しかし、HBSSを注射した場合）は低く、3.8±2.5パーセントにしか達しませんでした。
チャレンジの最初の目標は、死亡率の20〜30パーセントでした。今回の裁判では、 チャレンジされた魚で観察された総死亡率は42.5±6.5％であったため、チャレンジは予想よりも強かった[図2を参照]。
5kg /トンに等しい用量の植物性物質の栄養補助食品は、ニジマスにおけるエルシニア・ルッケリの感染に対して強力な保護効果を示しました。 NC食餌を与えられた魚と比較して、 PhytogenicTDとPhytogenicEXを与えられた人は、死亡率の有意な相対的減少を示しました（それぞれ41から47パーセントの範囲）。添加剤は、NC治療で継続的に増加したのに対し、チャレンジ後8日で死亡率が変化しなかったため、エルシニアの影響を迅速に安定させました。
マッシュ（押し出し前）とトップコーティング（押し出し後）の両方の塗布モードで効果的であることがわかり、植物性物質が押し出しプロセスでその生物学的有効性を失わないことを示唆しています。
効果的な制御
この研究では、Yersinia ruckeriによる感染に対するニジマス（Oncorhynchus mykiss）の成長能力と耐性に対する市販の植物性植物の保護効果を評価しました。
副次的な目的は、押し出しまたはトップドレッシングの用途を比較することにより、製品に含まれる活性物質の生物学的有効性に対する押し出しプロセスの影響を比較することでもありました。
この飼料添加物は、困難な条件下でマスを効率的に制御できると結論付けました。 アプリケーションのモードが何であれ。これらの結果は、さまざまな水生種ですでに実証されている製品の有効性を統合し、この植物性がすべての水産養殖システムで抗生物質の使用を制御するための全体的なアプローチと見なすことができることを確認します。
