家庭でキノコを栽培することは非常にやりがいがあり、おいしい食用キノコや薬用キノコを入手するにはいくつかの方法があります。
しかし、すべてのキノコが同じというわけではありません。気に入ったキノコに出会った場合は、液体培養物を作成して菌糸体を増殖させることが、継続的な供給を確保するための優れた方法です。
キノコの液体培養、それが役立つ理由、液体培養の作り方、液体培養を使用してより多くのキノコを栽培する方法について詳しく学びましょう。
液体培養とは何ですか?
略してLCと呼ばれることが多い液体培養は、生きたキノコ菌糸体を含む栄養豊富な滅菌溶液です。 キノコ栽培者は液体培養を使用して、キノコの菌糸体を成長させ、保存し、他の培地に移します。
液体培養物の作り方を知ることは、小規模の自家栽培者にとって有益であり、材料や器具は比較的簡単に入手できます。
ただし、無菌技術を使用することは非常に重要であり、溶液を滅菌するための圧力鍋と接種用の清潔なスペースが必要です。
液体培養は胞子注射器と同じですか?
液体培養は胞子注射器と同じではありません。胞子注射器には滅菌水中にキノコの胞子が含まれており、液体培養には栄養豊富な溶液中に生きたキノコの菌糸体が含まれています。
私たちの記事「液体培養と胞子シリンジ:どちらがあなたに適していますか?」これら 2 つの違いと、自分にとって最適なものを選択する方法について詳しくは、「」を参照してください。
胞子から液体培養物を作ることはできますか?
はい、胞子から液体培養物を作ることはできますが、菌糸体が形成され、栄養豊富な溶液にコロニーが形成されるまでにははるかに時間がかかります。
胞子を使用して液体培養を行うもう 1 つの欠点は、2 つの胞子が結合して菌糸を形成するときに新しい株が作成され、遺伝形質の予測が困難になることです。
胞子を使用して液体培養を行う場合は、オンラインで胞子注射器を購入するか、キノコの胞子プリントを作成して自分で胞子を収集することができます。
液体培養を段階的に作る方法
液体培養を作成するにはいくつかの方法があるため、開始する前に、次のようないくつかの決定を行う必要があります。
- どの種類のキノコを育てたいですか? 可能であれば、丈夫で成長が早い実績のある株を選択してください。
- 栄養価の高い溶液にキノコ培養物または胞子を追加する予定ですか? 純粋培養物を増殖させると何が得られるかはご存知のとおり、胞子ではなくキノコ培養物を使用することをお勧めします。
- 溶液にはどの砂糖を使用しますか? 液体培養のレシピはいくつかありますが、麦芽エキス、蜂蜜、コーン シロップが一般的な選択肢です。
決定したら、以下の手順に従って液体培養物を作成します。
ステップ 1:物資を集める
液体培養物を作成するには、次のものが必要です。
- 蓋が変更されたメイソン ジャー – AirMac または穀物スポーン ジャーをオンラインで購入できます。これらには、自己修復注入ポートと空気交換用のフィルターが付いている蓋が付いています。また、すでにメイソン ジャーをお持ちの場合は、AirMac の蓋を個別に購入することもできます。または、よりコスト効率の高い方法として、標準のメイソン ジャーの蓋を自分で変更することもできます。
- 栄養素を提供する砂糖。有機ハチミツ、コーンシロップ、コーンシュガー、ライトモルトエキス、ブドウ糖（ブドウ糖）はすべて有効です。
- 滅菌用の圧力鍋。
- ガラス大理石、ガラス片、または磁気スターラーバーとプレート。これらは、インキュベーション中の培養物の撹拌を支援するために使用します。 (オプション)
- キノコの胞子または培養物。胞子注射器、液体培養、または寒天培養をオンラインで注文できます。
- 16 ～ 18 ゲージの針またはメスを備えた 10 ml の注射器（培養の選択による）
- 滅菌手袋。
- イソプロピル アルコール。
- 針やメスを滅菌するためのアルコール バーナーまたはその他の安定した火源
ステップ 2:栄養豊富なソリューションを作成する
必要なものがすべて揃ったら、菌糸体が食べるための栄養価の高い溶液を作成します。
液体培養液はどうやって作るのですか？ほとんどの生産者は、砂糖と水の比率は 4% が最適であることに同意していますが、3% から 5% の間であれば問題ありません。
必要な水と栄養素の量は、瓶のサイズによって異なります。ただし、一般的には、瓶の中身を 80% 程度まで充填することを目指します。
たとえば、パイント (473 ml) の瓶を使用している場合は、水 400 ml と選択した砂糖小さじ 4 杯 (16 g) を加え、完全に溶けるまでかき混ぜます。
不気味なキノコからの画像
液体培養レシピ
液体培養ソリューションを作成するために使用できる液体培養レシピが多数あります。ただし、自分に合った解決策が見つかるまで、材料を試してみることもできます。
生産者によっては、菌糸体の成長を促進するために追加の成分を追加する人もいますが、これらは溶液を濁らせ、汚染を隠す可能性があるため注意してください。
ここでは、人気のある液体培養レシピをいくつか紹介します。
- ライトモルトエキス (LME) のレシピ :ライトモルトエキス(LME)20gと酵母エキス2gを水500mlに加え、溶けるまでかき混ぜます。これは最も一般的に使用されるレシピの 1 つです。
- カロ液体培養レシピ :カロライトコーンシロップ16gを水400mlに加え、完全に溶けるまでかき混ぜます。
- はちみつ液体培養レシピ :蜂蜜 16g (小さじ 4 杯) を水 400 ml に加え、蜂蜜が溶けるまでかき混ぜます。
- カロと LME のレシピ :カロライトコーンシロップ16gとライトモルトエキス(LME)4gを水500mlに加えます。小鍋に材料を入れて混ぜ、液体が透明になるまでゆっくり加熱します。混合物を沸騰させないでください。
- ポテトデキストロース寒天 (PDA) のレシピ ：皮をむいて刻んだジャガイモ2個を500mlの水で30分間茹でます。液体を濾してジャガイモの破片を取り除き、ブドウ糖 20g と寒天 15g を加え、溶けるまでかき混ぜます。
ステップ 3:滅菌
溶液の準備ができたら、それを瓶に入れ、ガラス玉、ガラス片、または磁気撹拌棒を加えます。 次に、AirMac または改造したメイソン ジャーの蓋でジャーを閉じます。
標準的なメイソンジャーの蓋を改造するには、ハンマーと釘を使って穴を開け、2 枚のマイクロポア テープで蓋をします。
フィルターから水が入らないように、密閉した瓶の上部をアルミホイルで覆います。次に、瓶が側面に触れないように圧力鍋に置きます。
金属ラック、瓶の蓋、または布を使用して、圧力鍋の底から瓶を持ち上げます。こうすることでひび割れを防ぐことができます。
圧力鍋に水を加え、メーカーの指示に従って、15PSI で 30 分間瓶を滅菌します。
時間が来たら火を止め、瓶を圧力鍋の中で冷まします。
不気味なキノコからの画像
ステップ 4:予防接種
接種は、キノコの胞子または菌糸体を滅菌培地に追加するプロセスです。
溶液への接種には、胞子シリンジ、液体培養、または寒天培養を使用できます。どちらを使用する場合でも、無菌状態で作業する必要があります。
既存の液体培養物を使用している場合は、汚染物質が増殖しないように、信頼できるベンダーからのものであるか、純粋培養物であることを確認してください。
あなたが作成した栄養豊富な溶液は、菌糸体の成長に最適です。しかし、カビや細菌などの汚染物質に対しても最適です。
ほとんどの生産者は層流フードの前に清潔なワークステーションを使用しますが、静止エア ボックスやグローブ ボックスを使用することもできます。
始める前に、溶液が室温まで冷えていることを確認し、蓋、瓶の外側、ワークステーションをアルコールで拭きます。
胞子または液体培養シリンジの針を、ジャーの蓋の自己修復注入ポートまたは穴を通してジャーに挿入し、溶液をジャーに注入します。
針が新しい場合は滅菌する必要はありませんが、古い針を使用している場合は、使用前に火で滅菌する必要があります。
新しく挿入された胞子または菌糸体を溶液全体に分散させるために、瓶を静かに振ってください。
寒天培地を使用して溶液を接種する場合は、瓶の蓋を外す必要があるため、汚染の可能性が高くなります。したがって、この方法は層流フードの前で行うのが最適です。
加熱滅菌したメスを使用して、寒天培地を素早く切り取り、寒天プレートから瓶に移し、蓋を閉めます。
キノコのクローン作成に関する記事では、寒天プレートとその使用方法について詳しく説明しています。
ステップ 5:インキュベーション
培養中、キノコの菌糸体は溶液全体で成長し、提供された栄養素を栄養にします。
必要なのは、一定の温度の保護された場所に瓶を置くことだけです。
理想的な孵化温度は種によって異なります。したがって、栽培しているキノコの種類に適した培養温度を調べることが最善です。
瓶を毎日チェックしますが、菌糸体の塊が形成されているのが見えるまでは瓶を壊さないでください。これにかかる時間は、栽培している種と提供する条件によって異なります。
液体培養物または寒天培養物には生きた菌糸体が含まれているため、通常、胞子よりも早く溶液にコロニーが形成されます。 2～7 日以内に最初の顕著な増殖が確認され、3 週間以内に完全な定着が見られます。
胞子から液体培養物を作るのにどれくらい時間がかかりますか？ 胞子を使用して液体培養物を作成する場合、通常、顕著な菌糸体が形成されるまでに 5 ～ 15 日かかり、完全なコロニー形成にはさらに 7 ～ 21 日かかります。
不気味なキノコからの画像
溶液中に菌糸体の塊が形成されているのを確認したら、混合物を旋回または撹拌して酸素を導入し、均一に定着させるために菌糸体を破壊して分散させる必要があります。
これは単に瓶を回して振るだけでも行えますが、より効果的に撹拌するには、滅菌前にガラスビー玉などの何かを挿入して撹拌しやすくします。
ガラス片や大理石を使用している場合は、瓶が割れる可能性があるため、激しく振りすぎないよう注意してください。
液体培養を定期的に行う生産者は、マグネチックスターラーの使用を選択することがよくあります。
これには、磁気撹拌棒を溶液に挿入し、回転撹拌プレートを使用してジャー内の磁石を移動させ、菌糸体を破壊して分散させる渦を作成することが含まれます。
液体培養物をどのくらいの頻度でかき混ぜたり、振ったりする必要がありますか?
これについてはいくつかの意見がありますが、一般的に栽培者は、1 日に 1 回瓶を回したり、かき混ぜたり、振ったりすることを推奨しています。
成長が非常に遅い菌株の場合は、小さな糸状ではなく菌糸体の塊または雲が形成されているのが確認された場合にのみ、2 日おきに振るだけでよい場合があります。
培養物全体で菌糸体の均一な分布を維持することは、健全な成長を促進するのに役立ちます。
液体培養物の保存方法
キノコの液体培養物の寿命を延ばすには、冷蔵庫や涼しい地下室などの冷暗所に保管してください。
温度が低いと菌糸体の成長が遅くなり、菌糸体を紫外線から遠ざけることで培養が確実に生存できるようになります。
液体培養物はどのくらいの期間保存できますか?
正しく保存された場合、キノコの液体培養物は冷蔵庫で 6 ～ 12 か月間保存できますが、生産者は一般に、最も生存能力が高い時期であるため、1 ～ 2 か月以内に使い切ることを推奨しています。
液体培養物の汚染
インキュベーション中および保管中は、液体培養物に汚染の兆候がないか定期的にチェックする必要があります。
以下に、注意すべき兆候をいくつか示します。
- 液体全体が白濁しており、何も成長しません – これは細菌汚染の兆候であり、何も増殖しないため、他の形態の汚染よりも発見しやすいです。
- 液体培養物は異臭がしており、瓶はわずかに加圧されています – 細菌汚染の別の兆候
- 緑色のカビの生えたカスの層が上に浮かんでいるのがわかります – あなたの文化の中でカビが生えている兆候。腐った臭いがする可能性も高くなります。
- 急速に成長し、不規則な形をした白い塊 – 白カビ汚染の兆候である可能性がありますが、菌糸体と区別するのが難しい場合があります。古い臭いがしていないか確認し、確実に成長する様子を記録してください。
健康的な液体培養とはどのようなものですか?
健康な液体培養物は透明で、菌糸体のきれいな白い塊が浮遊しています。菌糸体をそのまま放置すると、大きく構造化された塊が形成されます。しかし、かき混ぜると小さな塊がたくさんできます。
液体は瓶の反対側が見えるほど透明である必要があります。 場合によっては、液体培養物がわずかに曇り、後で再び透明になることがあります。
これは、わずかな細菌汚染がある場合に起こりますが、菌糸体は十分に大きく有利なスタートを切り、細菌を撃退して培養物に定着するのに十分な強度を持っています。
液体培養の長所と短所
液体培養により、キノコ栽培者は好みのキノコ株を増殖および保存できるようになり、いくつかの利点があります。 、以下を含む：
- 必要な道具のほとんどが一般的な家庭用品で済むため比較的安価であり、初心者にとっても利用しやすい
- 大量の菌糸体を提供します。これを数回増殖させて、お気に入りのキノコを継続的に生産するために使用できます。
- 液体培養を使用すると、生存可能な生きた菌糸体が含まれるため、定着率が向上し、培養時間を短縮できます。また、菌糸体はほぼ無制限に供給できるため、少し多めに使用することで定着時間をさらに短縮することができます。
しかし、ほとんどのキノコ栽培技術と同様に、 液体培養にもいくつかの欠点があります。 以下を含めて検討してください。
- 汚染を防ぐための無菌作業環境と技術が必要。作業スペースや機器を完全に清潔に保つのは必ずしも簡単ではありません。新規栽培者が汚染物質のない液体培養物を作成するには、多くの場合、数回の試行が必要です。
- 液体培養中の汚染を見つけるのは難しい場合があります。つまり、培養液を使用して汚染が広がるときに初めて汚染に気づくことになります。
- 文化を監視し、定期的に撹拌することは非常に実践的です。潜伏期間中ずっとそばにいる必要があります。
液体培養物を使用して、さらに液体培養物を作成したり、滅菌穀物に接種して穀物を産卵させたりすることができます。液体培養を使用して基質に直接接種することもできますが、生産者はこの方法を推奨しません。
彼らは、最初にグレインスポーンを作成し、それをバルク基板に接種するために使用することを提案しています。
これは、粒子のスポーンが分解しやすく、基質全体に均一に分布するため、定着率が高まり、汚染の可能性が減少するためです。
液体培養物を使用するには、以下の手順に従ってください。
ステップ 1:ワークスペースを準備する
汚染を防ぐには、無菌状態で作業する必要があります。清潔さは非常に重要です。
すべての表面とツールを 70% イソプロピル アルコールで拭き、空気中の汚染物質を最小限に抑えるために清潔な密閉環境で作業するか、できれば層流フードの前で作業します。
液体培養物の瓶を冷蔵庫から取り出し、室温に戻します。
滅菌した瓶または穀物の栽培用バッグ、新しい滅菌注射器と針が近くにあることを確認し、すべての容器の外側をイソプロピル アルコールで拭きます。
ステップ 2:培養液をかき混ぜる
液体培養ジャーをかき混ぜたり振ると、菌糸体が破壊され、溶液全体に均一に分散され、菌糸体が豊富な溶液を注射器に入れやすくなります。
ステップ 3:液体培養物を移す
空の滅菌注射器の滅菌針を液体培養ジャーの蓋の自己修復ポートまたは穴に挿入し、菌糸体が豊富な溶液をゆっくりと吸い上げます。
次に、注入ポートを使用して穀物瓶または袋に液体培養物を注入します。一般に、栽培者は穀物 1 ポンド (453 グラム) あたり 1 ～ 2 ml の液体培地を使用することを推奨します。
これに基づいて、クォート サイズ (946 ml) の穀物瓶に接種するには 1 ～ 2 ml の液体培養物を使用し、5 ポンド (2.3 kg) の滅菌穀物袋には 10 ml の液体培養物を使用できます。
初心者のキノコ栽培者向けのトップ 10 のヒントをご覧ください。
最終的な考え
液体培養の作り方を知ることで、キノコ栽培者は好みのキノコ株の菌糸体を増殖させ、ほぼ無制限に供給できるようになります。
高価な機器を使わずに液体培養を作るのは比較的簡単ですが、汚染を防ぐために無菌技術を使用する必要があり、これは困難な場合があります。
ほとんどのスキルと同様、キノコ栽培も完璧にするには時間と練習が必要で、試行錯誤によって学びます。したがって、液体培養の最初のバッチに汚染の兆候が見られた場合でも、諦めないでください。
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